Question:
Comment dois-je expédier des plasmides?
Nick T
2011-12-15 03:26:35 UTC
view on stackexchange narkive permalink

J'ai expédié 10 µL de mon vecteur miniprep à un collaborateur dans un parafilm eppendorf de 1,5 mL fermé et placé dans un cône de 50 mL avec un rembourrage en papier absorbant. Cependant, quelque chose s'est passé sur le chemin et il n'y avait rien (pas de liquide) dans le tube à son arrivée. Ils n'ont fait aucun commentaire sur le tube de microcentrifugeuse qui s'est ouvert ou que le parafilm est cassé, donc rien de fou ne s'est produit, mais quelque chose s'est produit.

Quelle est la manière la plus fiable d'envoyer des plasmides?

Six réponses:
#1
+17
Jonas
2011-12-15 03:38:37 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Un moyen assez sûr d'envoyer des plasmides est de les mettre sur du papier filtre (voir protocole et d'envoyer une lettre. Beaucoup moins cher.

+1 Rapide, facile et très stable même pour les envois à l'étranger.
De plus, les coutumes sont beaucoup moins pointilleuses sur un morceau de papier que sur tout ce qui est liquide.
C'est la meilleure façon de procéder. Vous pouvez également envelopper le papier filtre dans un peu de pellicule plastique au cas où.
#2
+12
AnnaF
2011-12-15 03:37:16 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Ont-ils essayé de centrifuger le tube une fois arrivé pour pousser tout le liquide au fond? Je sais que, surtout lorsque vous travaillez avec de si petites quantités, même en le secouant un peu, le contenu peut se disperser dans tout le tube. D'une manière générale, les plasmides sont envoyés dans des tubes de microcentrifugeuse à bouchon à vis à l'intérieur d'une sorte de cartouche. Ceci est ensuite emballé dans une petite glacière en mousse avec de la glace sèche pour garder tout au froid.

#3
+12
Mac Cowell
2011-12-15 04:36:41 UTC
view on stackexchange narkive permalink

  • les 10 uL de plasmide miniprep ont peut-être été éclaboussés dans le bouchon du tube (AnnaF)
  • le tube eppendorf peut avoir dépressurisé pendant le transport aérien et laissé les 10 uL s'échapper et s'évaporer
  • solution: essayez de sécher à l'air ou de tamponner (Jonas) vos minipreps avant le transport aérien

Comme l'a écrit AnnaF, les 10 uL de votre plasmide pourraient avoir été cachés dans le capuchon ou dispersés autour du tube, faisant paraître vide. Vous devriez vérifier auprès de vos collaborateurs pour vous assurer qu'ils l'ont centrifugé.

Selon un document fedex sur l'expédition des denrées périssables (pdf) et un papier mesurant la température et la pression de les envois aériens (pdf), fedex et les envois aériens UPS peuvent subir des environnements à basse pression d'environ 0,56 à 0,74 atmosphères (atm). À ces pressions relativement basses, peut-être qu'un tube Eppendorf scellé à 1 atm pourrait se rompre. Les journaux notent également que les envois terrestres qui passent au-dessus des Rocheuses (c'est-à-dire au Colorado) peuvent subir ~ 0,64 atm.

Alors peut-être que votre tube eppendorf de 1,5 ml est dépressurisé pendant l'expédition?

Il serait intéressant de faire quelques tests sur la résistance à la pression des tubes eppendorf.

Concernant la question initiale, en 2007 j'ai préparé et expédié (fedex) une bibliothèque de milliers de minipreps à des centaines d'utilisateurs. 1 ul de miniprep a été distribué dans des puits de plaques à 384 puits et séché à l'air, puis scellé avec de l'aluminium, puis envoyé par la poste. Les utilisateurs réhydratent un puits avec 10 uL d'eau. En général, cela fonctionne.

#4
+5
chaoticdawn
2011-12-22 04:14:23 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Étant donné que les tubes peuvent être écrasés par la poste, le moyen le plus sûr d'expédier des plasmides est de verser quelques uL dans un papier filtre, puis de l'envelopper pour le sceller avec du parafilm, et de remplir un formulaire détaillé sur son contenu.

Bonne chance.

#5
+4
gkadam
2011-12-24 10:45:16 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Nous nous sommes retrouvés dans des situations similaires lorsque d'autres laboratoires nous ont envoyé des plasmides (ou lorsque nous avons sorti d'anciens tubes des boîtes de stockage à -20), et avons depuis adopté la méthode du papier filtre. Un autre point à noter est que vous pouvez simplement ajouter, disons, 10 μL d'eau au tube «vide» (Mac) et utiliser 1 μL pour une transformation. Cela a toujours fonctionné pour nous. L'ADN est apparemment invisible!

#6
+1
user560
2012-03-04 09:38:57 UTC
view on stackexchange narkive permalink

Je recommanderai également fortement de tamponner un microgramme de votre ADN plasmidique sur un morceau de papier filtre (le papier filtre est important pour l'extraction du côté récepteur). De plus, il est très très utile d'indiquer clairement la quantité d'ADN (approximativement) et d'encercler l'ADN buvard dans un stylo afin qu'il n'y ait aucune ambiguïté quant à la découpe du cercle de papier filtre contenant l'ADN.

Activé côté récepteur, vous devez toujours congeler le papier tout de suite ou éluer l'ADN du papier dans du tampon TE ou de l'eau, puis le congeler. Si vous ne le faites pas, vous finirez par entraîner une dégradation de la DNAase de l'ADN plasmidique et vous devrez alors attendre une autre expédition.



Ce Q&R a été automatiquement traduit de la langue anglaise.Le contenu original est disponible sur stackexchange, que nous remercions pour la licence cc by-sa 3.0 sous laquelle il est distribué.
Loading...