Question:
Pourquoi les enzymes de restriction ne sont-elles pas congelées?
gkadam
2011-12-24 04:17:58 UTC
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Nous savons tous que les enzymes de restriction sont des protéines, mais nous ne les congelons jamais. Ils sont plutôt fournis dans des solutions à haute teneur en glycérol par les entreprises et stockés à -20 ° C. Y a-t-il une raison à cela?

Deux réponses:
#1
+13
Mad Scientist
2011-12-24 04:56:50 UTC
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Il est tellement plus pratique de préparer les enzymes sans avoir à les décongeler. La principale raison pour laquelle vous congelez les enzymes est de les garder actives, si vous trouvez un tampon qui les maintient non gelées sans compromettre l'activité, c'est une énorme augmentation de la commodité.

Ne pas avoir à décongeler les enzymes avant utilisation enregistre beaucoup de temps, si vous parvenez à maintenir les enzymes actives dans ces conditions sans congélation, c'est un net avantage.

Le glycérol stabilise également les protéines en solution et la congélation multiple et les cycles de décongélation peuvent affecter négativement l'activité enzymatique de certaines enzymes.

En plus: vous pouvez faire de même avec les anticorps. À la réception, diluez-les 1: 2 dans du glycérol et vous pouvez éviter de les aliquoter et ne pas avoir à vous soucier des cycles de congélation (n'oubliez pas de doubler la quantité lorsque vous les utilisez, cependant)!
Le glycérol est également ajouté en tant qu'agent antigel, de sorte que l'enzyme peut être maintenue à basse température (faible énergie cinétique) et donc rester stable pendant de plus longues périodes de temps.
#2
+5
Rob O'Callahan
2011-12-25 04:01:30 UTC
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Les cycles de gel-dégel dénaturent les protéines par des effets de changement de pH local

Un peu bref? :)
Cela fait passer le message.


Ce Q&R a été automatiquement traduit de la langue anglaise.Le contenu original est disponible sur stackexchange, que nous remercions pour la licence cc by-sa 3.0 sous laquelle il est distribué.
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