Question:
Applications recommandées pour les anticorps commerciaux
walkytalky
2011-12-17 18:29:29 UTC
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Les fournisseurs commerciaux d'anticorps primaires pour des protéines cibles données répertorient généralement les applications recommandées, pour lesquelles l'anticorps a vraisemblablement démontré son efficacité. Je cherche généralement à les utiliser pour l'immunofluorescence, et mon impression (qui peut être basée sur un échantillon non représentatif) est que la plupart des anticorps ne sont recommandés que pour une utilisation avec Western Blotting.

Pourquoi? WB est-elle l'application la plus courante? Le plus général? Est-ce plus facile à tester que IF?

Et, peut-être plus précisément, à quel point faut-il prendre au sérieux ces recommandations? Si un anticorps n'est pas recommandé pour la FI, cela signifie-t-il qu'il ne fonctionnera probablement pas? Ou que cela pourrait bien mais que personne ne se soit donné la peine de vérifier? Ou que ce sera presque certainement le cas?

Deux réponses:
#1
+7
nico
2011-12-18 16:18:27 UTC
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Peut-être que WB est plus facile à tester pour eux?

En général, cependant, ma recommandation est de vérifier s'ils fournissent des références au papier en utilisant ces anticorps et de regarder les images sur le papier.

Faites attention en mettant votre confiance dans les photos du fournisseur, j'ai vu des images évidemment photoshoppées sur des sites commerciaux.Egalement, vérifiez toujours les papiers référencés, car parfois ils n'utilisent pas vraiment le même produit que celui vendu ...

Autre que cela, d'après mon expérience, l'application recommandée est juste cela: recommandé. L'anticorps peut aussi bien fonctionner pour une autre application.Cela dit, notez qu'il existe une justification pour un anticorps fonctionnant pour la WB et non pour l'IHC, par exemple: la perfusion avec des fixateurs tels que le PFA modifiera la structure 3D de la protéine cible et peut masquer (ou révéler) certains épitops, de sorte que l'anticorps peut être plus ou moins efficace selon la forme de la protéine à laquelle vous avez affaire (native, fixée en PFA, fixée en glutaraldéhyde, dénaturée en SDS, etc.)

#2
+3
Naofumi Kagami
2011-12-22 07:22:32 UTC
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Les anticorps pour WB et pour IF ont des exigences fondamentalement différentes pour la structure de l'épitope. Les anticorps anti-WB reconnaissent les structures dénaturées prolongées par le traitement SDS. Les anticorps anti-IF devront souvent reconnaître une structure de type natif.

Selon le fournisseur, certains auront beaucoup d'anticorps anti-IF. Je suggère de regarder un peu plus.



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